不同季节茶树EGCG含量变化研究

摘要：本文研究了40份茶树资源春、夏、秋三季茶树新梢EGCG的含量变化，结果表明，40份资源EGCG年含量平均为6.88%，三季茶树ECCG平均含量夏>春>秋；含量变化最大的是秋梢，变异系数为0.27。同时获得3份资源：22号(10.07%)、31号( 10.020lo)、39号(10.11%)，EGCG三季平均含量超过10%。

关键词：茶树资源；季节；ECCG

茶叶中含有丰富的茶多酚，其含量高达茶叶干重的20%—33%，包括儿茶素类、黄酮及黄酮苷、花青素类及酚酸化合物等几大类。茶多酚的主要成分是儿茶素，儿茶素又可分为非酯型儿茶素（简单儿茶素）和酯型儿茶素（复杂儿茶素）。其中酯型儿茶素所占比例最大，为茶多酚总量的55%左右，其含量为茶叶干重的12%—l9%，包括EGCG、ECG、GCG等组分。EGCG为酯型儿茶素，近年来大量科学研究表明，EGCG是绿茶的主要活性成分，具有多种功效，在抑菌、抗病毒、预防心血管疾病、抗痛、防辐射、延缓衰老等方面有着不可替代的重要作用。茶叶是天然EGCG的唯一来源，且EGCG在茶树体内的分布存在较大差异，其中以嫩梢中含量最高川。茶树为多年生植物，且呈现季节轮次性生长，不同的生长季节，其代谢特征有较大差异，本文主要考察了不同季节茶树嫩梢中EGCG的含量差异，兹将分析结果报道如下。

1  材料与方法

1.1材料

在石门茶区（含东山峰）选择40份资源，采摘一芽二叶，采用蒸青法固定样品，统一测定EGCG含量。

1.2仪器和化学药品

LC-4A高效液相色谱仪（日本岛津）、RF-530检测器、ISC -07Na型分离柱、PRR -2蠕动泵、C-R3A数据处理机、艾科浦分析型实验室纯水机（重庆颐洋企业发展有限公司）、AB204 -S电子天平、DK-S26型电热恒温水浴锅（上海精密实验设备有限公司）、高速电动植物粉碎机（江苏银河平衡仪器厂）、电子天平（德国产）：BS2000S，d=0.0001g、铝盒：内径4—5cm，高3~4cm，具盖。

化学药品：甲酰胺（色谱纯），甲醇（分析纯），冰醋酸（分析纯）。

1.3方法

1.3.1含水率测定(103±20℃)

将铝盒洗净，编号，烘干至恒重，记下重量。用四分法取粉碎碎茶样，称取10.00g，置于铝盒中，再用电子天平( d=0.0001g)称重，置于烘箱内，去盖，斜置于盒边，在103±2℃烘箱内烘4h，加盖取出，在干燥器内冷却至室温后，称重。在103±2℃烘箱内再烘60min，再称重。直至连续两次称重之差不超过0.005g，即为恒重。依烘干前后的重量之差，计算茶样含水率。

1.3.2试样制备

磨样→过筛→称重0.50g置于50mL三角瓶中→加入30%乙醇40mL→置于水浴锅微沸30min←过滤到lOOmL容量瓶→冷却定容→用微量注射器取lOuL→色谱检测。

1.3.3  色谱分析

进样量：10uL；固定相：Shim-pack，ODS C185LLm，4.6 x150mm，柱温380C；流动相：A水，B甲酰胺：甲醇：冰醋酸=40:2:1.5；流速：1.1mL/min；检测波长：278nm。

洗脱梯度见下表

2结果与分析

据报道，不同茶树品种，其新梢EGCG含量差异很大，介于6%—11%(占鲜叶干物重的百分率)，即品种间差异可达l倍左右。本实验结果表明（表2、表3）：在40份资源中，大多数新梢EGCG含量介于6%~10%，春梢、夏梢、秋梢分别占72.5%、85.0%、47.5%；而高于10%者，春梢、夏梢、秋梢分别占2.5%、7.5%、0；低于6%的春梢、夏梢、秋梢分别占10%、25.5%、52.5%。表3中极差显示，品种间EGCG含量变化差异较大，三季的极差均大于6%，如39号夏梢EGCG含量高达10.57%，16号为5.66%，9号仅4.460/0。40个品种或株系春梢EGCG含量变化范围为2.99%—10.31%，平均6.69%，即最高或最低含量相差2.4倍多，变异系数为0.23。夏梢EGCG含量的范围为4.46%—10.570/0，平均7.61%，即最高和最低相差1.4倍，变异系数为0.18。秋梢EGCG含量范围为3.280/0—9.890/0，平均6.07010，即最高和最低相差2.0倍，变异系数为0.27。

茶树新梢EGCG含量需要处于什么水平，才可视为高EGCG的特异资源，目前尚未见有该方面的报道，据我国两次茶树种质资源筛选的资料表明：茶多酚含量高于34%者，视为超常规水平的品种或株系。EGCG含量一般占茶多酚总量的40%，以此为依据，则EGCG高于13%者，即可视为超常规水平的品种或株系。本试验结果表明（表2）：在40份资源中，EGCG含量春、夏、秋三季平均值超过130/0者未有发现。有3份资源超过10010，分别为22号(10.06%)、31号( 10.02%)、39号(10.14%)，这3份高EGCG资源，对开发利用EGCG有重要价值。

3讨论

茶树中含有丰富的多酚类化合物（简称茶多酚），其含量高达鲜叶干物重的20%～35%，其中EGCG（epigallocatechin-3 -gallate，表没食子儿茶素没食子酸酯）所占比例最大，为茶多酚总量的40%左右，其含量高达鲜叶干物重的8%~14%。在茶树体内主要是由（一）一表没食子儿茶素和没食子酸经酯化作用形成，其关键性的调节酶受光温等外界条件调控，从而表现出季节性含量的差异。此外，茶树新梢的不同伸育程度，EGCG变化显著，随伸育程度增长含量渐次降低。本研究中，EGCG含量表现夏>春>秋的趋势，一是夏季光照强，气温高，茶树光合作用强，碳代谢旺盛，多酚类形成总量比春秋两季多，所以EGCG含量为三季中含量最高，在茶叶品质上，表现为涩味重，与杨贤强等的研究结果一致。春季与秋季比较，春季含量要高于秋季，可能是由于采摘相同的一芽二叶原料，秋季原料由于温度、光照、水分的环境因素影响，其木质化程度要高于春季。

不同品种的茶树，其EGCG含量也是有差异的，主要是由于控制酶基因的差异所致。EGCG的生物合成，从种子萌发开始，首先合成L-EC与D，L-C等非酯型儿茶素，再经羟基化或者没食子酰基化形成的阴。因此，不同的品种其羟基化、没食子酰基化强度有很大差异。云南大叶种含有较多的简单儿茶素L-EC、D，L-C，认为是其保持了原始特性。那么EGCG含量高的品种，可能是由于茶树应对外界环境变化而进化的结果，从而也表现出本研究中40份资源EGCG的含量各异。